مقایسه روش های باکتری شناسی، سرم شناسی و pcr در تشخیص بروسلوز شتر

بروسلوز یک بیماری باکتریایی مشترک بین انسان و دام (زئونوز) است، که دارای اهمیت فراوان جهانی می باشد. این بیماری طیف وسیعی از پستانداران شامل انسان، گاو، گوسفند، شتر، بز، خوک، جوندگان و پستانداران دریایی را درگیر می کند. بروسلوز هم از جنبه بهداشت عمومی و هم از لحاظ اقتصادی حائز اهمیت است. خسارات اقتصادی ناشی از بروسلا در گله الوده، علاوه بر حذف دام شامل مواردی چون کاهش تولید شیر و سقط جنین در حیوانات حساس می باشد. شتر یکی از گونه های حساس به بروسلوز است و بیماری در آن به شکل سقط جنین و به میزان کمتری تورم بیضه و عفونت غدد جنسی ضمیمه است. شتر به وسیله یکی از گونه های اصلی بروسلا یعنی بروسلا آبورتوس یا بروسلا ملی تنسیس آلوده می شود. اساس تشخیص بیماری در برنامه های مبارزه و ریشه کنی شامل آزمایشات سرم شناسی می باشد. اگرچه این آزمایشات آسان و سریع هستند، ولی دارای معایبی از جمله وجود واکنش های متقاطع سرمی، عدم وجود پادتن در آغاز بیماری و وجود آنتی بادی های ناقص و بلوکان می باشند. جداسازی و تشخیص باکتری توسط تکنیک های میکروبیولوژی مطمئن ترین روش و استاندارد طلائی تشخیصی بروسلوز می باشد، ولی این روش اکثراً موفقیت آمیز نبوده، دارای مشکلاتی از قبیل زمانبر بودن، لزوم مهارت بالای فرد آزمایش کننده، ریسک بالای آلودگی و... می باشد. در حالیکه در برنامه های مبارزه و ریشه کنی، مجهز شدن به ابزاری دقیق و کارآمد جهت تشخیص بیماری ضروری می باشد، زیرا یکی از اساسی ترین مراحل، شناسایی دقیق و سریع دام های رآکتور و حذف آنها از گله می باشد. در این تحقیق 310 نمونه خون از شترهای در حال ذبح کشتارگاه نجف آباد تهیه شد و روی تمامی آنها آزمایشات سرم شناسی صورت گرفت. dna از 100 نمونه خون و سرم، از جمله موارد مثبت در آزمایش رزبنگال (39 مورد) استخراج و روی تمامی آنها nested-pcr اختصاصی جنس، با بکارگیری دو جفت پرایمر داخلی و خارجی بر روی ژن s rrna16 انجام و طی دو مرحله قطعه bp958 تکثیر شد. 100 عقده لنفاوی نیز روی محیط انتخابی بروسلا آگار حاوی سرم غیرفعال شده اسب (5%) و مکمل آنتی بیوتیکی کشت و در گرمخانه 37 درجه حاوی 10-5 درصد دی اکسیدکربن به مدت 14 روز نگهداری شد. در این تحقیق آزمایشات سرم شناسی بروسلوز 94/1% (6مورد) نمونه ها را مثبت تشخیص داد، در حالیکه از هیچکدام از عقده های لنفاوی کشت داده شده، باکتری بروسلا جدا نشد. نتایج nested-pcr بترتیب 9/1 (6 مورد) و 9/2 (9 مورد) درصد را در سرم و خون مثبت ارزیابی کرد، که به ترتیب 1 و 3 مورد از این موارد را آزمایشات سرم شناسی منفی ارزیابی کرده بود. نتایج این تحقیق حساسیت بالاتر nested-pcr را نسبت به آزمایشات سرم شناسی نشان می دهد. هرچند آزمایشات سرم شناسی و مولکولی جایگزین مناسبی برای آزمایشات باکتریولوژی به شمار می آورد. همچنین این تحقیق تأکید می کند که با توجه به داخل سلولی بودن بروسلا، خون نسبت به سرم نمونه بهتری جهت انجام pcr می باشد. کلمات کلیدی: بروسلوز، شتر، سرم شناسی، باکتری شناسی، pcr